Resposta exata: 4 horas a 5 dias
Quando alguns ácidos nucleicos são induzidos artificialmente em células saudáveis, o processo é denominado transfecção. O processo permite que o ácido nucleico contorne a membrana celular para entrar na célula. É usado em ciências biológicas para estudar vários outros processos celulares alterados que resultam da introdução dessas partículas de RNA e DNA.
GFP, por outro lado, significa proteína fluorescente verde. GFP é usado como uma molécula de relatório para a expressão gênica em biologia, uma vez que emite fluorescência verde sob luz azul. A expressão de GFP é estudada em relação às células transfectadas. Também é usado para estudar estruturas celulares em embriões e fetos.
Quanto tempo após a expressão de GFP de transfecção?
Através do processo de transfecção, torna-se possível introduzir ácidos nucleicos em células de mamíferos sem vetores virais. Este método de transferência de genes permite que os pesquisadores estudem a função gênica e a expressão de proteínas em ambientes celulares.
Geralmente, os pesquisadores observam que em 90% das células sob observação, a Proteína Verde Fluorescente é visível dentro de 4 horas após a transfecção. No entanto, em algumas células, pode levar até 5 dias para mostrar os efeitos da transfecção. Em outras palavras, para que a proteína de fluorescência verde seja visível ao microscópio, pode levar até 5 dias.
A expressão de GFP pode ser articulada em fatores como o uso de agentes transfectantes químicos ou físicos. No caso do primeiro, descobrimos que a expressão GFP acontece mais cedo ou mais tarde. Isso implicaria que o agente químico de transfecção funciona mais rápido em nível celular do que os agentes físicos.
Alternativamente, os agentes de transfecção física podem demorar um pouco para mostrar a expressão de GFP nas células de mamífero. Eles funcionam mais lentamente do que os agentes químicos de transfecção de ação rápida. Além disso, os pesquisadores também afirmaram que o estágio do ciclo celular, quando uma determinada célula é selecionada, também afeta o momento em que a expressão de GFP ocorre na célula escolhida.
É igualmente importante notar que a pesquisa nesta área tem sido escassa. Esta é também uma razão primordial para a ausência de resultados extremamente conclusivos sobre o assunto. Portanto, é prudente propor que a maioria das células de mamífero apresentará expressão de GFP dentro de 4 a 6 horas após a transfecção.
Em resumo:
| Agente de transfecção usado | Tempo necessário para mostrar a expressão GFP |
| Agentes químicos | 4 horas |
| Agentes Físicos | Até dia 5 |
Por que a expressão GFP demora tanto após a transfecção?
A expressão de GFP é emblemática do fato de que a transfecção foi bem sucedida e a estrutura do gene agora está alterada. Para que isso aconteça, o agente transfectado deve ter tempo para iniciar a alteração estrutural. Assim, leva algum tempo para ser visível ao microscópio.
As expressões de GFP podem ser rápidas em algumas células após a transfecção devido ao tipo de agente usado para induzir os ácidos nucleicos nas células de mamífero. Se um vetor químico for usado, o resultado será invariavelmente acelerado. Pode-se então esperar ver a expressão da proteína fluorescente verde dentro de algumas horas da transfecção.
No entanto, se forem usados agentes físicos, a expressão de transfecção por meio de GFP levará mais tempo. Da mesma forma, a estrutura celular também pode atrasar o processo em alguns dias. As células têm que atingir um nível de estabilidade antes que possam ser testadas para proteínas fluorescentes verdes sob o microscópio.
A embebição dos ácidos nucléicos deve demorar um pouco porque se está tentando alterar manualmente a composição química da célula. Esta é uma alteração estrutural significativa que não pode - na maioria dos casos - ser simplificada pelo uso de um catalisador. Assim, como cientista, você precisa dar tempo às células para se adaptarem e mudarem em seu próprio ritmo.
Portanto, é prudente esperar até uma semana para ver se a expressão GFP é visível em clusters de células. Como células diferentes reagem de maneira diferente, as diferenças de tempo na expressão gênica são apenas naturais e esperadas.
Conclusão
A transfecção pode ser muito romance e útil de alterar a composição química e a expressão genética de uma célula. É usado por cientistas para estudar células de mamíferos e sua resposta aos ácidos nucléicos induzidos.
Geralmente, os aglomerados de células tendem a demonstrar uma sessão de transfecção bem-sucedida dentro de 4 a 6 horas do processo. Isso é expresso através da proteína fluorescente verde que é visível nas células sob um microscópio. Em muito poucos casos, as células podem levar mais tempo para mostrar a expressão do gene alterado. Este período de tempo pode se estender até 5 dias em eventos tão raros.
Referências
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
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