Risposta esatta: da 4 ore a 5 giorni
Quando alcuni acidi nucleici vengono indotti artificialmente in cellule sane, il processo viene chiamato trasfezione. Il processo consente all'acido nucleico di bypassare la membrana cellulare per entrare nella cellula. Viene utilizzato nelle scienze biologiche per studiare vari altri processi cellulari alterati che risultano dall'introduzione di queste particelle di RNA e DNA.
GFP, d'altra parte, sta per proteina fluorescente verde. La GFP viene utilizzata come molecola di segnalazione per l'espressione genica in biologia poiché emette fluorescenza verde sotto luce blu. L'espressione di GFP è studiata per quanto riguarda le cellule trasfettate. Viene anche utilizzato per studiare le strutture cellulari negli embrioni e nei feti.
Quanto tempo dopo l'espressione GFP di trasfezione?
Attraverso il processo di trasfezione, diventa possibile introdurre acidi nucleici nelle cellule di mammifero senza vettori virali. Questo metodo di trasferimento genico consente ai ricercatori di studiare la funzione genica e l'espressione proteica negli ambienti cellulari.
In generale, i ricercatori osservano che nel 90% delle cellule sotto osservazione, la proteina fluorescente verde è visibile entro 4 ore dalla trasfezione. Tuttavia, in alcune cellule possono essere necessari fino a 5 giorni per mostrare gli effetti della trasfezione. In altre parole, affinché la proteina di fluorescenza verde sia visibile al microscopio, potrebbero essere necessari fino a 5 giorni.
L'espressione GFP può dipendere da fattori come l'uso di agenti trasfettanti chimici o fisici. Nel caso del primo, troviamo che l'espressione GFP avviene prima piuttosto che dopo. Ciò implicherebbe che l'agente di trasfezione chimica funziona più velocemente a livello cellulare rispetto agli agenti fisici.
In alternativa, gli agenti di trasfezione fisica possono impiegare del tempo per mostrare l'espressione di GFP nelle cellule di mammifero. Funzionano più lentamente degli agenti di trasfezione chimica ad azione rapida. Inoltre, i ricercatori hanno anche affermato che la fase del ciclo cellulare, quando viene selezionata una particolare cellula, influisce anche sul tempo in cui avviene l'espressione di GFP nella cellula scelta.
È altrettanto importante notare che la ricerca in questo campo è stata scarsa. Questa è anche una delle ragioni principali dell'assenza di risultati estremamente conclusivi sulla questione. È quindi prudente proporre che la maggior parte delle cellule di mammifero mostrerà l'espressione di GFP entro 4-6 ore dalla trasfezione.
In sintesi:
| Agente di trasfezione utilizzato | Tempo impiegato per mostrare l'espressione GFP |
| Agenti chimici | 4 ore |
| Agenti fisici | Fino a 5 giorni |
Perché l'espressione GFP impiega così tanto tempo dopo la trasfezione?
L'espressione GFP è emblematica del fatto che la trasfezione ha avuto successo e la struttura del gene ora è alterata. Affinché ciò avvenga, l'agente trasfettato deve avere il tempo di iniziare l'alterazione strutturale. Pertanto, ci vuole del tempo per essere visibili al microscopio.
Le espressioni di GFP possono essere rapide in alcune cellule dopo la trasfezione a causa del tipo di agente utilizzato per indurre gli acidi nucleici nelle cellule di mammifero. Se viene utilizzato un vettore chimico, il risultato sarà invariabilmente accelerato. Ci si può quindi aspettare di vedere l'espressione della proteina fluorescente verde entro poche ore dalla trasfezione.
Tuttavia, se vengono utilizzati agenti fisici, l'espressione della trasfezione tramite GFP richiederà più tempo. Allo stesso modo, la struttura cellulare può anche ritardare il processo di alcuni giorni. Le cellule devono poter raggiungere un livello di stabilità prima di poter essere testate per le proteine fluorescenti verdi al microscopio.
L'imbibizione degli acidi nucleici è destinata a richiedere del tempo perché si cerca di alterare manualmente la composizione chimica della cellula. Si tratta di un'alterazione strutturale significativa che, nella maggior parte dei casi, non può essere snellita dall'uso di un catalizzatore. Pertanto, come scienziato, devi dare alle cellule il tempo di adattarsi e cambiare al proprio ritmo.
È quindi prudente attendere fino a una settimana per vedere se l'espressione GFP è visibile nei cluster di cellule. Poiché cellule diverse reagiscono in modo diverso, le differenze di tempo nell'espressione genica sono solo naturali e previste.
Conclusione
La trasfezione può essere molto romanzo e un modo utile per modificare la composizione chimica e l'espressione genica di una cellula. Viene utilizzato dagli scienziati per studiare le cellule dei mammiferi e la loro risposta agli acidi nucleici indotti.
In genere, i cluster cellulari tendono a dimostrare una sessione di trasfezione riuscita entro 4-6 ore dal processo. Questo è espresso attraverso la proteina fluorescente verde che è visibile nelle cellule al microscopio. In pochissimi casi, le cellule possono impiegare più tempo per mostrare l'espressione genica modificata. Questo periodo di tempo può estendersi fino a 5 giorni in eventi così rari.
Riferimenti
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
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