كم من الوقت بعد تعبير GFP تعداء (ولماذا)؟

الإجابة الدقيقة: 4 ساعة إلى 5 أيام

عندما يتم تحفيز بعض الأحماض النووية بشكل مصطنع في الخلايا السليمة ، فإن العملية تسمى تعداء. تسمح العملية للحمض النووي بتجاوز غشاء الخلية لدخول الخلية. يتم استخدامه في العلوم البيولوجية لدراسة مختلف العمليات الخلوية المتغيرة الأخرى التي تنتج عن إدخال جزيئات الحمض النووي الريبي والحمض النووي.

من ناحية أخرى ، يرمز GFP إلى البروتين الفلوري الأخضر. يستخدم GFP كجزيء إبلاغ للتعبير الجيني في علم الأحياء لأنه ينبعث من الفلورة الخضراء تحت الضوء الأزرق. تمت دراسة تعبير GFP فيما يتعلق بالخلايا المنقولة. كما أنها تستخدم لدراسة هياكل الخلايا في الأجنة والأجنة.

كم من الوقت بعد ترنسفكأيشن GFP التعبير؟

من خلال عملية تعداء العدوى ، يصبح من الممكن إدخال الأحماض النووية في خلايا الثدييات بدون ناقلات فيروسية. تسمح طريقة نقل الجينات هذه للباحثين بدراسة وظيفة الجينات وتعبير البروتين في البيئات الخلوية.

بشكل عام ، لاحظ الباحثون أنه في 90٪ من الخلايا الخاضعة للمراقبة ، يكون البروتين الأخضر الفلوري مرئيًا خلال 4 ساعات من تعداء العدوى. ومع ذلك ، في بعض الخلايا ، قد يستغرق الأمر ما يصل إلى 5 أيام لإظهار آثار تعداء العدوى. بعبارة أخرى ، من أجل أن يكون بروتين التألق الأخضر مرئيًا تحت المجهر ، قد يستغرق الأمر ما يصل إلى 5 أيام.

قد يتوقف تعبير GFP على عوامل مثل استخدام العوامل الكيميائية أو الفيزيائية. في الحالة الأولى ، نجد أن تعبير GFP يحدث عاجلاً وليس آجلاً. وهذا يعني أن عامل تعداء العدوى الكيميائي يعمل بشكل أسرع على المستوى الخلوي من العوامل الفيزيائية.

بدلاً من ذلك ، قد تستغرق عوامل تعداء الجسدية بعض الوقت لإظهار تعبير GFP في خلايا الثدييات. إنها تعمل بشكل أبطأ من عوامل تعداء العدوى الكيميائية السريعة. علاوة على ذلك ، ذكر الباحثون أيضًا أن مرحلة دورة الخلية ، عند اختيار خلية معينة ، تؤثر أيضًا على الوقت الذي يحدث فيه تعبير GFP في الخلية المختارة.

من المهم بنفس القدر ملاحظة أن البحث في هذا المجال كان هزيلًا. وهذا أيضًا سبب رئيسي لغياب نتائج حاسمة للغاية بشأن هذه القضية. وبالتالي فمن الحكمة أن نقترح أن غالبية خلايا الثدييات ستظهر تعبير GFP في غضون 4 إلى 6 ساعات من تعداء.  

في الخلاصة:

لماذا يستغرق تعبير GFP وقتًا طويلاً بعد تعداء الوجه؟

تعبير GFP هو رمز لحقيقة أن تعداء كانت ناجحة وأن بنية الجين تقف الآن متغيرة. لكي يحدث هذا ، يجب إعطاء العامل المنقول وقتًا لبدء التغيير الهيكلي. وبالتالي ، يستغرق الأمر بعض الوقت حتى تكون مرئيًا تحت المجهر.

قد تكون تعبيرات GFP سريعة في بعض الخلايا بعد تعداء بسبب نوع العامل المستخدم لحث الأحماض النووية في خلايا الثدييات. إذا تم استخدام ناقل كيميائي ، فسيتم تسريع النتيجة دائمًا. يمكن للمرء بعد ذلك أن يتوقع رؤية تعبير البروتين الفلوري الأخضر في غضون ساعات قليلة من تعداء الجسم.

ومع ذلك ، إذا تم استخدام العوامل الفيزيائية ، فإن التعبير عن العدوى من خلال GFP سيستغرق بعض الوقت. وبالمثل ، قد يؤدي هيكل الخلية أيضًا إلى تأخير العملية لبضعة أيام. يجب السماح للخلايا بالوصول إلى مستوى من الاستقرار قبل اختبارها بحثًا عن البروتينات الفلورية الخضراء تحت المجهر.

لا بد أن يستغرق تشرب الأحماض النووية بعض الوقت لأن المرء يحاول تغيير التركيب الكيميائي للخلية يدويًا. هذا تغيير هيكلي كبير لا يمكن - في معظم الحالات - تبسيطه باستخدام محفز. وبالتالي ، كعالم ، عليك أن تمنح الخلايا الوقت للتكيف والتغيير في وتيرتها الخاصة.

وبالتالي فمن الحكمة الانتظار لمدة تصل إلى أسبوع لمعرفة ما إذا كان تعبير GFP مرئيًا في مجموعات الخلايا. نظرًا لأن الخلايا المختلفة تتفاعل بشكل مختلف ، فإن الاختلافات الزمنية في التعبير الجيني طبيعية ومتوقعة.

وفي الختام

يمكن أن يكون ترنسفكأيشن جدا رواية وطريقة مفيدة لتغيير التركيب الكيميائي للخلية والتعبير الجيني. يتم استخدامه من قبل العلماء لدراسة خلايا الثدييات واستجابتها للأحماض النووية المستحثة.

بشكل عام ، تميل مجموعات الخلايا إلى إظهار جلسة تعداء ناجحة في غضون 4 إلى 6 ساعات من العملية. يتم التعبير عن ذلك من خلال البروتين الفلوري الأخضر المرئي في الخلايا تحت المجهر. في حالات قليلة جدًا ، قد تستغرق الخلايا وقتًا أطول لإظهار التعبير الجيني المتغير. يمكن أن تمتد هذه الفترة الزمنية حتى 5 أيام في مثل هذه الأحداث النادرة.  

مراجع حسابات

1. https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
2. https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138