Réponse exacte : 4 heures à 5 jours
Lorsque certains acides nucléiques sont induits artificiellement dans des cellules saines, le processus est appelé transfection. Le processus permet à l'acide nucléique de contourner la membrane cellulaire pour pénétrer dans la cellule. Il est utilisé en sciences biologiques pour étudier divers autres processus cellulaires altérés résultant de l'introduction de ces particules d'ARN et d'ADN.
GFP, en revanche, signifie protéine fluorescente verte. La GFP est utilisée comme molécule rapporteuse pour l'expression génique en biologie car elle émet une fluorescence verte sous une lumière bleue. L'expression de la GFP est étudiée en ce qui concerne les cellules transfectées. Il est également utilisé pour étudier les structures cellulaires des embryons et des fœtus.
Combien de temps après l'expression de la transfection GFP ?
Grâce au processus de transfection, il devient possible d'introduire des acides nucléiques dans des cellules de mammifères sans vecteurs viraux. Cette méthode de transfert de gènes permet aux chercheurs d'étudier la fonction des gènes et l'expression des protéines dans les environnements cellulaires.
Généralement, les chercheurs notent que dans 90% des cellules sous observation, la protéine fluorescente verte est visible dans les 4 heures suivant la transfection. Cependant, dans certaines cellules, cela peut prendre jusqu'à 5 jours pour montrer les effets de la transfection. En d'autres termes, pour que la protéine de fluorescence verte soit visible au microscope, cela peut prendre jusqu'à 5 jours.
L'expression de la GFP peut dépendre de facteurs tels que l'utilisation d'agents de transfection chimiques ou physiques. Dans le cas du premier, nous constatons que l'expression de la GFP se produit plus tôt que tard. Cela impliquerait que l'agent de transfection chimique agit plus rapidement au niveau cellulaire que les agents physiques.
Alternativement, les agents de transfection physiques peuvent prendre un certain temps pour montrer l'expression de la GFP dans les cellules de mammifères. Ils agissent plus lentement que les agents chimiques de transfection à action rapide. De plus, les chercheurs ont également déclaré que le stade du cycle cellulaire, lorsqu'une cellule particulière est sélectionnée, affecte également le moment où l'expression de la GFP se produit dans la cellule choisie.
Il est tout aussi important de noter que la recherche dans ce domaine a été peu abondante. C'est aussi l'une des principales raisons de l'absence de résultats extrêmement concluants sur la question. Il est donc prudent de proposer que la majorité des cellules de mammifères montreront l'expression de la GFP dans les 4 à 6 heures suivant la transfection.
En résumé:
| Agent de transfection utilisé | Temps nécessaire pour afficher l'expression GFP |
| Agents chimiques | 4 heures |
| Agents physiques | Jusqu'à 5 jours |
Pourquoi l'expression GFP prend-elle si longtemps après la transfection ?
L'expression de la GFP est emblématique du fait que la transfection a réussi et que la structure du gène est maintenant modifiée. Pour que cela se produise, il faut donner à l'agent transfecté le temps d'initier l'altération structurelle. Ainsi, il faut un certain temps pour être visible au microscope.
Les expressions de la GFP peuvent être rapides dans certaines cellules après transfection en raison du type d'agent utilisé pour induire les acides nucléiques dans les cellules de mammifères. Si un vecteur chimique est utilisé, le résultat sera invariablement accéléré. On peut alors s'attendre à voir l'expression de la protéine fluorescente verte quelques heures après la transfection.
Cependant, si des agents physiques sont utilisés, l'expression de la transfection par GFP prendra un peu plus de temps. De même, la structure cellulaire peut également retarder le processus de quelques jours. Les cellules doivent être autorisées à atteindre un niveau de stabilité avant de pouvoir être testées pour les protéines fluorescentes vertes au microscope.
L'imbibition des acides nucléiques est tenue de prendre un certain temps car on essaie de modifier manuellement la composition chimique de la cellule. Il s'agit d'une modification structurelle importante qui ne peut pas, dans la plupart des cas, être rationalisée par l'utilisation d'un catalyseur. Ainsi, en tant que scientifique, vous devez donner aux cellules le temps de s'adapter et de changer à leur propre rythme.
Il est donc prudent d'attendre jusqu'à une semaine pour voir si l'expression de la GFP est visible dans les amas cellulaires. Étant donné que différentes cellules réagissent différemment, les différences de temps dans l'expression des gènes ne sont que naturelles et attendues.
Conclusion
La transfection peut être très roman et un moyen utile de modifier la composition chimique et l'expression des gènes d'une cellule. Il est utilisé par les scientifiques pour étudier les cellules de mammifères et leur réponse aux acides nucléiques induits.
Généralement, les grappes de cellules ont tendance à démontrer une session de transfection réussie dans les 4 à 6 heures suivant le processus. Ceci est exprimé par la protéine fluorescente verte qui est visible dans les cellules au microscope. Dans de très rares cas, les cellules peuvent prendre plus de temps pour montrer l'expression modifiée du gène. Cette période de temps peut s'étendre jusqu'à 5 jours dans ces événements rares.
Bibliographie
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
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