Точный ответ: от 4 часов до 5 дней
Когда некоторые нуклеиновые кислоты искусственно вводятся в здоровые клетки, этот процесс называется трансфекцией. Этот процесс позволяет нуклеиновой кислоте проникать в клетку в обход клеточной мембраны. Он используется в биологических науках для изучения различных других измененных клеточных процессов, возникающих в результате введения этих частиц РНК и ДНК.
С другой стороны, GFP означает зеленый флуоресцентный белок. GFP используется в качестве отчетной молекулы для экспрессии генов в биологии, поскольку он излучает зеленую флуоресценцию в синем свете. Экспрессию GFP исследуют в отношении трансфицированных клеток. Он также используется для изучения клеточных структур эмбрионов и плодов.
Как долго после трансфекции экспрессия GFP?
Благодаря процессу трансфекции становится возможным введение нуклеиновых кислот в клетки млекопитающих без использования вирусных векторов. Этот метод переноса генов позволяет исследователям изучать функции генов и экспрессию белков в клеточной среде.
Как правило, исследователи отмечают, что в 90% наблюдаемых клеток зеленый флуоресцентный белок виден в течение 4 часов после трансфекции. Однако в некоторых клетках для проявления эффектов трансфекции может потребоваться до 5 дней. Другими словами, для того чтобы зеленый флуоресцентный белок стал виден под микроскопом, может пройти до 5 дней.
Экспрессия GFP может зависеть от таких факторов, как использование химических или физических агентов для трансфекции. В случае первого мы обнаруживаем, что экспрессия GFP происходит скорее раньше, чем позже. Это означает, что агент химической трансфекции работает быстрее на клеточном уровне, чем физические агенты.
Альтернативно, физическим агентам трансфекции может потребоваться некоторое время, чтобы показать экспрессию GFP в клетках млекопитающих. Они действуют медленнее, чем быстродействующие химические агенты трансфекции. Более того, исследователи также заявили, что стадия клеточного цикла, когда выбирается конкретная клетка, также влияет на время, когда в выбранной клетке происходит экспрессия GFP.
Не менее важно отметить, что исследования в этой области были скудными. Это также основная причина отсутствия весьма убедительных результатов по этому вопросу. Таким образом, разумно предположить, что большинство клеток млекопитающих будут демонстрировать экспрессию GFP в пределах от 4 до 6 часов после трансфекции.
Краткое содержание:
| Используемый агент трансфекции | Время, затраченное на отображение выражения GFP |
| Химические агенты | 4 часа |
| Физические Агенты | До 5 дней |
Почему экспрессия GFP занимает так много времени после трансфекции?
Экспрессия GFP символизирует тот факт, что трансфекция прошла успешно и структура гена теперь изменилась. Чтобы это произошло, трансфицированному агенту нужно дать время, чтобы инициировать структурное изменение. Таким образом, требуется некоторое время, чтобы быть видимым под микроскопом.
Экспрессия GFP может быть быстрой в некоторых клетках после трансфекции из-за типа агента, используемого для индуцирования нуклеиновых кислот в клетки млекопитающих. Если используется химический вектор, результат неизменно будет ускорен. Затем можно ожидать увидеть экспрессию зеленого флуоресцентного белка в течение нескольких часов после трансфекции.
Однако, если используются физические агенты, экспрессия трансфекции через GFP займет некоторое время. Точно так же клеточная структура также может задержать процесс на несколько дней. Клетки должны достичь уровня стабильности, прежде чем их можно будет протестировать на наличие зеленых флуоресцентных белков под микроскопом.
Впитывание нуклеиновых кислот должно занять некоторое время, потому что человек пытается вручную изменить химический состав клетки. Это значительное структурное изменение, которое в большинстве случаев не может быть упрощено за счет использования катализатора. Таким образом, как ученый, вы должны дать клеткам время адаптироваться и измениться в своем собственном темпе.
Таким образом, разумно подождать до недели, чтобы увидеть, видно ли выражение GFP в клеточных кластерах. Поскольку разные клетки реагируют по-разному, временные различия в экспрессии генов вполне естественны и ожидаемы.
Заключение
Трансфекция может быть очень роман и полезный способ изменения химического состава клетки и экспрессии генов. Он используется учеными для изучения клеток млекопитающих и их реакции на индуцированные нуклеиновые кислоты.
Как правило, кластеры клеток обычно демонстрируют успешный сеанс трансфекции уже через 4-6 часов после процесса. Это выражается через зеленый флуоресцентный белок, который виден в клетках под микроскопом. В очень редких случаях клеткам может потребоваться больше времени, чтобы показать измененную экспрессию гена. В таких редких случаях этот период времени может увеличиваться до 5 дней.
Рекомендации
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
Я приложил столько усилий, чтобы написать этот пост в блоге, чтобы предоставить вам ценность. Это будет очень полезно для меня, если вы подумаете о том, чтобы поделиться им в социальных сетях или со своими друзьями/родными. ДЕЛИТЬСЯ ♥️
Всесторонний характер этой статьи дает ценную информацию о сложностях экспрессии генов. Это отличный ресурс для исследователей в этой области.
Я согласен, Кен Уокер. Глубина информации здесь полезна для продвижения исследований по трансфекции и экспрессии генов.
Объяснение того, почему экспрессия GFP занимает разное время, является поучительным. Это действительно иллюстрирует сложности экспрессии генов.
Хорошо сформулировал, Харви Купер. Это обеспечивает более глубокое понимание исследовательского процесса.
Абсолютно, Харви Купер. Эта статья проливает свет на сложную природу эффектов изменения генов.
Эта статья эффективно раскрывает нюансы изменений экспрессии генов после трансфекции. Это важный ресурс для ученых в этой области.
Абсолютно, Укелли. Изложенные здесь особенности ценны для совершенствования экспериментальных подходов в клеточных исследованиях.
Я нахожу удивительным, что в некоторых случаях экспрессия GFP может занять до 5 дней. Это дает ценную информацию о сложностях трансфекции.
Безусловно, важно учитывать эти факторы при проведении исследований экспрессии генов.
Действительно, Кьюнг. Это напоминание о различиях в реакции клеток на генетические изменения.
Сложности временных рамок экспрессии генов хорошо сформулированы в этой статье. Однако это подчеркивает необходимость дальнейших углубленных исследований для установления окончательных тенденций.
Я согласен, Рис14. Это открывает путь для будущих исследований, направленных на устранение нынешних пробелов в знаниях.
Абсолютно верно, и это подчеркивает динамическую природу экспрессии генов, требующую постоянных исследований.
Очень информативная статья. Это отличный способ понять процесс трансфекции и его влияние на экспрессию генов.
Я полностью с тобой согласен, Стефан45. Интересно наблюдать, как клетки реагируют на процесс трансфекции.
Интересная статья, но временные различия в уровнях экспрессии генов, похоже, в некоторой степени усложняют процесс исследования.
Я согласен, король Итан. Это создает определенные проблемы при планировании экспериментов и интерпретации данных.
В этой статье уточняются временные рамки, связанные с экспрессией GFP после трансфекции. Однако для формирования окончательных выводов необходимы дополнительные исследования.
Я согласен, Квилсон. В этой области исследований еще многое предстоит открыть.
В статье рассматриваются сложности трансфекции и экспрессии генов. Однако ограничения результатов исследований должным образом признаны.
Действительно, эта область созрела для дальнейших исследований, направленных на устранение существующих пробелов в знаниях.
Абсолютно, Аарон Батлер. Все еще существуют неопределенности, которые требуют дальнейшего расследования.
Подробное объяснение экспрессии GFP после трансфекции впечатляет. Понятно, как химические и физические агенты могут влиять на этот процесс.
Согласен, Дэвид96. Эта информация ценна для понимания динамики экспрессии генов.
Я ценю подробный анализ в этой статье. Это полезно для исследователей в этой области.