Přesná odpověď: 4 hodin až 5 dní
Když jsou některé nukleové kyseliny uměle indukovány do zdravých buněk, proces se nazývá transfekce. Tento proces umožňuje nukleové kyselině obejít buněčnou membránu a vstoupit do buňky. Používá se v biologických vědách ke studiu různých dalších změněných buněčných procesů, které jsou výsledkem zavedení těchto částic RNA a DNA.
GFP na druhé straně znamená zelený fluorescenční protein. GFP se používá jako reportovací molekula pro genovou expresi v biologii, protože pod modrým světlem vyzařuje zelenou fluorescenci. Exprese GFP je studována s ohledem na transfekované buňky. Používá se také ke studiu buněčných struktur u embryí a plodů.
Jak dlouho po transfekci se projeví GFP?
Prostřednictvím procesu transfekce je možné zavést nukleové kyseliny do savčích buněk bez virových vektorů. Tato metoda přenosu genů umožňuje výzkumníkům studovat funkci genů a expresi proteinů v buněčném prostředí.
Obecně vědci uvádějí, že v 90 % pozorovaných buněk je zelený fluorescenční protein viditelný do 4 hodin po transfekci. U některých buněk však může trvat až 5 dní, než se projeví účinky transfekce. Jinými slovy, aby byl protein zelené fluorescence viditelný pod mikroskopem, může to trvat až 5 dní.
Exprese GFP může záviset na faktorech, jako je použití chemických nebo fyzikálních transfekčních činidel. V prvním případě zjistíme, že k expresi GFP dochází spíše dříve než později. To by znamenalo, že chemické transfekční činidlo funguje na buněčné úrovni rychleji než fyzikální činidla.
Alternativně může fyzikálním transfekčním činidlům chvíli trvat, než projeví expresi GFP v savčích buňkách. Pracují pomaleji než rychle působící chemická transfekční činidla. Kromě toho vědci také uvedli, že fáze buněčného cyklu, kdy je vybrána konkrétní buňka, také ovlivňuje dobu, kdy dojde k expresi GFP ve vybrané buňce.
Stejně důležité je poznamenat, že výzkum v této aréně byl omezený. To je také hlavním důvodem absence extrémně průkazných výsledků v této otázce. Je tedy rozumné navrhnout, že většina savčích buněk bude vykazovat expresi GFP během 4 až 6 hodin po transfekci.
Souhrnně:
| Použitý transfekční prostředek | Čas potřebný k zobrazení výrazu GFP |
| Chemická činidla | 4 hodin |
| Fyzikální činitelé | Až 5 dny |
Proč trvá exprese GFP tak dlouho po transfekci?
Exprese GFP je symbolem skutečnosti, že transfekce byla úspěšná a genová struktura je nyní změněna. Aby k tomu došlo, musí transfekované činidlo dostat čas na zahájení strukturální změny. Trvá tedy nějakou dobu, než bude vidět pod mikroskopem.
Exprese GFP mohou být v některých buňkách po transfekci rychlé kvůli druhu činidla použitého k indukci nukleových kyselin do savčích buněk. Pokud je použit chemický vektor, výsledek bude vždy urychlen. Pak lze očekávat, že během několika hodin po transfekci uvidíme expresi zeleného fluorescenčního proteinu.
Pokud se však použijí fyzikální činidla, exprese transfekce prostřednictvím GFP bude nějakou dobu trvat. Podobně může buněčná struktura proces zpozdit o několik dní. Buňky musí být ponechány, aby dosáhly úrovně stability, než mohou být testovány na zelené fluorescenční proteiny pod mikroskopem.
Nasávání nukleových kyselin bude nějakou dobu trvat, protože se člověk pokouší ručně změnit chemické složení buňky. Jedná se o významnou strukturální změnu, kterou nelze - ve většině případů - zefektivnit použitím katalyzátoru. Jako vědec tedy musíte buňkám dát čas, aby se přizpůsobily a změnily se svým vlastním tempem.
Je proto rozumné počkat až týden, abyste zjistili, zda je exprese GFP viditelná v buněčných shlucích. Protože různé buňky reagují odlišně, časové rozdíly v genové expresi jsou pouze přirozené a očekávané.
Proč investovat do čističky vzduchu?
Transfekce může být velmi román a užitečný způsob změny chemického složení buňky a genové exprese. Vědci jej používají ke studiu savčích buněk a jejich reakce na indukované nukleové kyseliny.
Obecně mají buněčné shluky tendenci vykazovat úspěšnou transfekční relaci již za 4 až 6 hodin od procesu. To je vyjádřeno prostřednictvím zeleného fluorescenčního proteinu, který je viditelný v buňkách pod mikroskopem. Ve velmi málo případech může buňkám trvat déle, než projeví změněnou genovou expresi. Toto časové období se může u takto vzácných událostí prodloužit až na 5 dní.
Reference
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
Vynaložil jsem tolik úsilí, abych napsal tento blogový příspěvek, abych vám poskytl hodnotu. Bude to pro mě velmi užitečné, pokud zvážíte sdílení na sociálních sítích nebo se svými přáteli / rodinou. SDÍLENÍ JE ♥️
Komplexní povaha tohoto článku poskytuje cenné poznatky o složitosti genové exprese. Je to skvělý zdroj pro výzkumníky v oboru.
Souhlasím, Ken Walkere. Hloubka informací zde je přínosná pro pokrok ve výzkumu transfekce a genové exprese.
Vysvětlení, proč exprese GFP trvá různě dlouho, je poučné. Skutečně ilustruje složitost genové exprese.
Dobře řečeno, Harvey Coopere. To poskytuje hlubší pochopení procesu výzkumu.
Rozhodně, Harvey Cooper. Tento článek vrhá světlo na složitou povahu efektů změny genů.
Tento článek účinně sděluje nuance změn genové exprese po transfekci. Je to nezbytný zdroj pro vědce v této oblasti.
Určitě, Wkelly. Zde uvedená specifika jsou cenná pro zdokonalování experimentálních přístupů v buněčném výzkumu.
Považuji za překvapivé, že exprese GFP může v některých případech trvat až 5 dní. To poskytuje cenné poznatky o složitosti transfekce.
Při provádění výzkumu genové exprese je naprosto nezbytné vzít v úvahu tyto faktory.
Opravdu, Qyoung. Je to připomínka změn v buněčných odpovědích na genetické změny.
Složitost časových os genové exprese je dobře popsána v tomto článku. Zdůrazňuje však potřebu dalších hloubkových studií ke stanovení definitivních trendů.
Souhlasím, Reece14. To otevírá cestu pro budoucí výzkum, který se zaměří na současné mezery ve znalostech.
Absolutně a zdůrazňuje dynamickou povahu genové exprese, což vyžaduje neustálé zkoumání.
Velmi poučný článek. Je to skvělý způsob, jak pochopit proces transfekce a její dopad na genovou expresi.
Naprosto s tebou souhlasím, Stefan45. Je fascinující vidět, jak buňky reagují na proces transfekce.
Zajímavý článek, ale zdá se, že časové rozdíly v hladinách genové exprese do určité míry komplikují proces výzkumu.
Souhlasím, králi Ethane. Představuje určité výzvy v experimentálním designu a interpretaci dat.
Tento článek objasňuje časové rámce spojené s expresí GFP po transfekci. K vytvoření definitivních závěrů je však zapotřebí dalšího výzkumu.
Souhlasím, Cwilsone. V této oblasti studia je stále co odhalovat.
Článek se ponoří do složitosti transfekce a genové exprese. Omezení ve výsledcích výzkumu jsou však náležitě uznávána.
Ve skutečnosti je to oblast zralá pro další průzkum, který by řešil stávající mezery ve znalostech.
Rozhodně, Aarone Butlere. Stále existují nejasnosti, které vyžadují další vyšetřování.
Podrobné vysvětlení exprese GFP po transfekci je působivé. Je jasné, jak chemické a fyzikální látky mohou tento proces ovlivnit.
Souhlas, David96. Tyto informace jsou cenné pro pochopení dynamiky genové exprese.
Oceňuji důkladnou analýzu v tomto článku. Je to přínosné pro výzkumníky v této oblasti.