Genaue Antwort: 4 Stunden bis 5 Tage
Wenn einige Nukleinsäuren künstlich in gesunde Zellen induziert werden, wird der Vorgang als Transfektion bezeichnet. Das Verfahren ermöglicht es der Nukleinsäure, die Zellmembran zu umgehen, um in die Zelle einzudringen. Es wird in den Biowissenschaften verwendet, um verschiedene andere veränderte zelluläre Prozesse zu untersuchen, die aus der Einführung dieser RNA- und DNA-Partikel resultieren.
GFP hingegen steht für grün fluoreszierendes Protein. GFP wird als Meldemolekül für die Genexpression in der Biologie verwendet, da es unter blauem Licht grün fluoresziert. Die GFP-Expression wird in Bezug auf transfizierte Zellen untersucht. Es wird auch verwendet, um Zellstrukturen in Embryonen und Föten zu untersuchen.
Wie lange nach der Transfektion GFP-Expression?
Durch den Prozess der Transfektion wird es möglich, Nukleinsäuren ohne virale Vektoren in Säugerzellen einzuführen. Diese Gentransfermethode ermöglicht es Forschern, die Genfunktion und Proteinexpression in zellulären Umgebungen zu untersuchen.
Im Allgemeinen stellen die Forscher fest, dass in 90 % der beobachteten Zellen das grün fluoreszierende Protein innerhalb von 4 Stunden nach der Transfektion sichtbar ist. Bei manchen Zellen kann es jedoch bis zu 5 Tage dauern, bis sich die Auswirkungen der Transfektion zeigen. Mit anderen Worten, bis das grün fluoreszierende Protein unter dem Mikroskop sichtbar wird, kann es bis zu 5 Tage dauern.
Die GFP-Expression kann von Faktoren wie der Verwendung chemischer oder physikalischer Transfektionsmittel abhängen. Im Fall des ersteren stellen wir fest, dass die GFP-Expression eher früher als später erfolgt. Dies würde bedeuten, dass das chemische Transfektionsmittel auf zellulärer Ebene schneller wirkt als die physikalischen Mittel.
Alternativ können physikalische Transfektionsmittel eine Weile brauchen, um eine GFP-Expression in den Säugerzellen zu zeigen. Sie wirken langsamer als die schnell wirkenden chemischen Transfektionsmittel. Darüber hinaus haben Forscher auch festgestellt, dass das Zellzyklusstadium, wenn eine bestimmte Zelle ausgewählt wird, auch den Zeitpunkt beeinflusst, zu dem die GFP-Expression in der ausgewählten Zelle stattfindet.
Es ist ebenso wichtig anzumerken, dass die Forschung in diesem Bereich spärlich ist. Dies ist auch ein wesentlicher Grund für das Fehlen äußerst aussagekräftiger Ergebnisse zu diesem Thema. Es ist daher vernünftig anzunehmen, dass die Mehrheit der Säugerzellen GFP-Expression innerhalb von 4 bis 6 Stunden nach der Transfektion zeigen wird.
In Zusammenfassung:
| Transfektionsmittel verwendet | Zeit bis zum Anzeigen des GFP-Ausdrucks |
| Chemische Mittel | 4 Stunden |
| Physikalische Agenten | Bis zu 5 Tag |
Warum dauert die GFP-Expression so lange nach der Transfektion?
Die GFP-Expression ist sinnbildlich dafür, dass die Transfektion erfolgreich war und die Genstruktur nun verändert ist. Dazu muss dem transfizierten Erreger Zeit gegeben werden, die Strukturveränderung einzuleiten. Daher dauert es einige Zeit, bis sie unter einem Mikroskop sichtbar sind.
GFP-Expressionen können in manchen Zellen nach der Transfektion wegen der Art des Mittels, das verwendet wird, um die Nukleinsäuren in die Säugerzellen zu induzieren, schnell sein. Wenn ein chemischer Vektor verwendet wird, wird das Ergebnis unweigerlich beschleunigt. Man kann dann innerhalb weniger Stunden nach der Transfektion eine Expression des grün fluoreszierenden Proteins erwarten.
Wenn jedoch physikalische Mittel verwendet werden, wird die Transfektionsexpression durch GFP etwas mehr Zeit in Anspruch nehmen. Ebenso kann die Zellstruktur den Prozess um einige Tage verzögern. Die Zellen müssen einen gewissen Stabilitätsgrad erreichen, bevor sie unter dem Mikroskop auf grün fluoreszierende Proteine getestet werden können.
Die Aufnahme der Nukleinsäuren wird zwangsläufig eine Weile dauern, weil man versucht, die chemische Zusammensetzung der Zelle manuell zu verändern. Dies ist eine erhebliche strukturelle Änderung, die in den meisten Fällen nicht durch die Verwendung eines Katalysators rationalisiert werden kann. Als Wissenschaftler muss man den Zellen also Zeit geben, sich in ihrem eigenen Tempo anzupassen und zu verändern.
Es ist daher ratsam, bis zu einer Woche zu warten, um zu sehen, ob die GFP-Expression in Zellclustern sichtbar ist. Da verschiedene Zellen unterschiedlich reagieren, sind Zeitunterschiede in der Genexpression nur natürlich und zu erwarten.
Zusammenfassung
Die Transfektion kann sehr sein Roman und nützliche Möglichkeit, die chemische Zusammensetzung und Genexpression einer Zelle zu verändern. Es wird von Wissenschaftlern verwendet, um Säugetierzellen und ihre Reaktion auf die induzierten Nukleinsäuren zu untersuchen.
Im Allgemeinen neigen Zellcluster dazu, eine erfolgreiche Transfektionssitzung bereits innerhalb von 4 bis 6 Stunden nach dem Prozess zu demonstrieren. Dies wird durch das grün fluoreszierende Protein ausgedrückt, das in den Zellen unter dem Mikroskop sichtbar ist. In sehr wenigen Fällen kann es länger dauern, bis Zellen die veränderte Genexpression zeigen. Dieser Zeitraum kann sich in solchen seltenen Fällen auf bis zu 5 Tage verlängern.
Bibliographie
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
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