Točan odgovor: 4 sati do 5 dana
Kada se neke nukleinske kiseline umjetno induciraju u zdrave stanice, proces se naziva transfekcija. Proces omogućuje nukleinskoj kiselini da zaobiđe staničnu membranu kako bi ušla u stanicu. Koristi se u biološkim znanostima za proučavanje raznih drugih izmijenjenih staničnih procesa koji su rezultat uvođenja ovih RNA i DNA čestica.
GFP, s druge strane, označava zeleni fluorescentni protein. GFP se koristi kao molekula za izvještavanje za ekspresiju gena u biologiji budući da emitira zelenu fluorescenciju pod plavim svjetlom. GFP ekspresija se proučava u odnosu na transficirane stanice. Također se koristi za proučavanje staničnih struktura u embrijima i fetusima.
Koliko dugo nakon transfekcije GFP ekspresija?
Procesom transfekcije postaje moguće uvesti nukleinske kiseline u stanice sisavaca bez virusnih vektora. Ova metoda prijenosa gena omogućuje istraživačima proučavanje funkcije gena i ekspresije proteina u staničnom okruženju.
Općenito, istraživači primjećuju da je u 90% stanica koje se promatraju zeleni fluorescentni protein vidljiv unutar 4 sata od transfekcije. Međutim, u nekim stanicama može proći i do 5 dana da se pokažu učinci transfekcije. Drugim riječima, da bi zeleni fluorescentni protein bio vidljiv pod mikroskopom, može proći i do 5 dana.
Ekspresija GFP-a može ovisiti o čimbenicima poput upotrebe kemijskih ili fizičkih sredstava za transfekciju. U slučaju prvog, nalazimo da se GFP ekspresija događa prije nego kasnije. To bi značilo da kemijsko sredstvo za transfekciju djeluje brže na staničnoj razini od fizičkih sredstava.
Alternativno, sredstvima za fizičku transfekciju može trebati neko vrijeme da pokažu GFP ekspresiju u stanicama sisavaca. Djeluju sporije od kemijskih sredstava za transfekciju brzog djelovanja. Štoviše, istraživači su također izjavili da stadij staničnog ciklusa, kada je odabrana određena stanica također utječe na vrijeme kada se GFP ekspresija događa u odabranoj stanici.
Jednako je važno napomenuti da su istraživanja u ovoj areni bila oskudna. Ovo je također glavni razlog za izostanak krajnje uvjerljivih rezultata o tom pitanju. Stoga je mudro pretpostaviti da će većina stanica sisavaca pokazati GFP ekspresiju unutar 4 do 6 sati od transfekcije.
U sažetku:
| Upotrijebljeno sredstvo za transfekciju | Vrijeme potrebno za prikaz GFP izraza |
| Kemijska sredstva | 4 sati |
| Fizički agenti | Do 5 dana |
Zašto je GFP ekspresiji potrebno toliko dugo nakon transfekcije?
Ekspresija GFP simbol je činjenice da je transfekcija bila uspješna i da je struktura gena sada promijenjena. Da bi se to dogodilo, transfektiranom uzročniku mora se dati vremena da započne strukturnu promjenu. Stoga je potrebno neko vrijeme da bude vidljiv pod mikroskopom.
GFP ekspresija može biti brza u nekim stanicama nakon transfekcije zbog vrste agensa koji se koristi za induciranje nukleinskih kiselina u stanice sisavaca. Ako se koristi kemijski vektor, rezultat će uvijek biti ubrzan. Tada se može očekivati ekspresija zelenog fluorescentnog proteina unutar nekoliko sati od transfekcije.
Međutim, ako se koriste fizički agensi, ekspresija transfekcije kroz GFP će potrajati još neko vrijeme. Slično tome, stanična struktura također može odgoditi proces za nekoliko dana. Stanicama se mora dopustiti da dostignu razinu stabilnosti prije nego što se mogu testirati na zelene fluorescentne proteine pod mikroskopom.
Upijanje nukleinskih kiselina mora potrajati neko vrijeme jer se pokušava ručno promijeniti kemijski sastav stanice. Ovo je značajna strukturna promjena koja se ne može - u većini slučajeva - pojednostaviti upotrebom katalizatora. Stoga, kao znanstvenik, morate dati stanicama vremena da se prilagode i mijenjaju vlastitim tempom.
Stoga je mudro pričekati do tjedan dana da se vidi je li ekspresija GFP vidljiva u klasterima stanica. Budući da različite stanice različito reagiraju, vremenske razlike u ekspresiji gena su prirodne i očekivane.
Zaključak
Transfekcija može biti vrlo roman i koristan način mijenjanja kemijskog sastava stanice i ekspresije gena. Znanstvenici ga koriste za proučavanje stanica sisavaca i njihovog odgovora na inducirane nukleinske kiseline.
Općenito, klasteri stanica pokazuju uspješnu sesiju transfekcije već unutar 4 do 6 sati od procesa. To se izražava kroz zeleni fluorescentni protein koji je vidljiv u stanicama pod mikroskopom. U vrlo malom broju slučajeva stanicama može trebati više vremena da pokažu promijenjenu ekspresiju gena. To se vremensko razdoblje može produžiti do 5 dana u takvim rijetkim slučajevima.
Reference
- https://link.springer.com/article/10.1007/s004240050445
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168010298001138
Uložio sam mnogo truda u pisanje ovog posta na blogu kako bih vam pružio vrijednost. Bit će mi od velike pomoći ako razmislite o tome da to podijelite na društvenim medijima ili sa svojim prijateljima/obitelji. DIJELJENJE JE ♥️
Sveobuhvatna priroda ovog članka pruža vrijedan uvid u složenost ekspresije gena. To je izvrstan izvor za istraživače na tom području.
Slažem se, Ken Walker. Dubina informacija ovdje korisna je za unaprjeđenje istraživanja o transfekciji i ekspresiji gena.
Objašnjenje zašto je GFP izražavanje potrebno različito dugo je prosvjetljujuće. To uistinu ilustrira složenost ekspresije gena.
Dobro artikulirano, Harvey Cooper. To omogućuje dublje razumijevanje procesa istraživanja.
Apsolutno, Harvey Cooper. Ovaj članak baca svjetlo na zamršenu prirodu učinaka izmjene gena.
Ovaj članak učinkovito govori o nijansama promjena ekspresije gena nakon transfekcije. To je bitan izvor za znanstvenike u ovom području.
Apsolutno, Wkelly. Ovdje navedene specifičnosti vrijedne su za usavršavanje eksperimentalnih pristupa u staničnim istraživanjima.
Iznenađuje me da GFP ekspresija u nekim slučajevima može potrajati i do 5 dana. To daje vrijedan uvid u složenost transfekcije.
Apsolutno, bitno je uzeti u obzir ove čimbenike kada provodite istraživanje ekspresije gena.
Doista, Qyoung. To je podsjetnik na varijacije u odgovoru stanica na genetske promjene.
Složenost vremenskih linija ekspresije gena dobro je artikulirana u ovom članku. Međutim, naglašava potrebu za daljnjim dubinskim studijama kako bi se utvrdili konačni trendovi.
Slažem se, Reece14. Ovo utire put budućim istraživanjima za rješavanje trenutnih praznina u znanju.
Apsolutno, i naglašava dinamičku prirodu ekspresije gena, što zahtijeva kontinuirano istraživanje.
Vrlo informativan članak. Ovo je izvrstan način za razumijevanje procesa transfekcije i njegovog utjecaja na ekspresiju gena.
U potpunosti se slažem s tobom, Stefan45. Fascinantno je vidjeti kako stanice reagiraju na proces transfekcije.
Zanimljiv članak, ali čini se da vremenske razlike u razinama ekspresije gena u određenoj mjeri kompliciraju proces istraživanja.
Slažem se, kralju Ethane. Predstavlja određene izazove u dizajnu eksperimenta i interpretaciji podataka.
Ovaj članak pojašnjava vremenske okvire povezane s GFP ekspresijom nakon transfekcije. Međutim, potrebna su dodatna istraživanja kako bi se došli do konačnih zaključaka.
Slažem se, Cwilson. Ima još mnogo toga za otkriti u ovom području proučavanja.
Članak se bavi složenošću transfekcije i ekspresije gena. Međutim, ograničenja u nalazima istraživanja valjano su priznata.
Doista, to je područje zrelo za daljnja istraživanja kako bi se riješile postojeće praznine u znanju.
Apsolutno, Aaron Butler. Još uvijek postoje nejasnoće koje zahtijevaju daljnje istraživanje.
Detaljno objašnjenje GFP ekspresije nakon transfekcije je impresivno. Jasno je kako kemijski i fizički agensi mogu utjecati na proces.
Slažem se, David96. Ova informacija je vrijedna za razumijevanje dinamike ekspresije gena.
Cijenim temeljitu analizu u ovom članku. To je korisno za istraživače u ovom području.